造血干細(xì)胞(hematopoietic stem cells,HSC)是具有自我復(fù)制和多向分化潛能的原始細(xì)胞,又稱(chēng)多功能干細(xì)胞。造血干細(xì)胞一般以其表面膜蛋白(如CD38,CD40等)作為marker進(jìn)行流式分選獲得,為了區(qū)分不同亞型的造血干細(xì)胞、實(shí)現(xiàn)精細(xì)化分群,需要進(jìn)一步以其膜內(nèi)溶酶體蛋白作為marker來(lái)進(jìn)行亞型的分選。為了實(shí)現(xiàn)膜內(nèi)溶酶體蛋白的抗體染色,需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行破膜處理才能讓染料進(jìn)入實(shí)現(xiàn)膜內(nèi)蛋白染色;而細(xì)胞經(jīng)過(guò)固定破膜處理之后會(huì)失去活性,無(wú)法進(jìn)一步開(kāi)展功能實(shí)驗(yàn)。因此本研究目的在于能夠獲得與已知溶酶體marker高度符合的細(xì)胞表面特異性膜蛋白來(lái)替代溶酶體蛋白marker,在不進(jìn)行破膜處理影響細(xì)胞活性的同時(shí)實(shí)現(xiàn)造血干細(xì)胞的分離,為HSC亞型區(qū)分的功能實(shí)驗(yàn)和深入機(jī)制研究奠定基礎(chǔ)。
通過(guò)膜蛋白marker分選得到的造血干細(xì)胞數(shù)量可以達(dá)到上萬(wàn)個(gè),而通過(guò)膜內(nèi)溶酶體marker進(jìn)一步細(xì)分不同的造血干細(xì)胞類(lèi)型,單一類(lèi)型的造血干細(xì)胞數(shù)量往往只有幾百個(gè),因此無(wú)法采用常規(guī)的蛋白質(zhì)組學(xué)樣本處理方案進(jìn)行分析。貝普奧生物(BayOmics)核心技術(shù)之一SISPROT是一種基于固相萃取小柱的集成式蛋白質(zhì)組學(xué)前處理技術(shù),該技術(shù)兼具高靈敏度、高通量及高穩(wěn)定性的特點(diǎn),尤其適用于低微克甚至納克級(jí)別的蛋白質(zhì)樣本。
本研究采用SISPROT® PAC超微量樣本前處理方案從低至500個(gè)細(xì)胞以及低至10 ng蛋白起始量的造血干細(xì)胞樣本中,穩(wěn)定獲得了3000+種蛋白,其中20%以上為膜蛋白。本研究結(jié)果表明采用SISPROT® PAC 超微量樣本前處理方案為微量造血干細(xì)胞樣本研究提供了高深度蛋白質(zhì)組學(xué)檢測(cè),為造血干細(xì)胞的類(lèi)型分離及功能研究提供了重要的數(shù)據(jù)支持。
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深圳市貝普奧生物科技有限公司是一家于2022年1月在深圳成立的蛋白質(zhì)組學(xué)研發(fā)型高科技公司。作為蛋白質(zhì)組學(xué)上游市場(chǎng)解決方案提供商,公司致力于對(duì)蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域的研發(fā)成果進(jìn)行商業(yè)開(kāi)發(fā)及轉(zhuǎn)化。團(tuán)隊(duì)以受多項(xiàng)專(zhuān)利保護(hù)的蛋白質(zhì)組學(xué)前處理系列產(chǎn)品為切入點(diǎn),通過(guò)臨床功能蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)平臺(tái)為目標(biāo)市場(chǎng)提供全流程解決方案。
公司核心成員在蛋白質(zhì)組學(xué)、腫瘤生物學(xué)領(lǐng)域獲得重大科研成果,超半數(shù)員工擁有博士、碩士學(xué)位及海外研究經(jīng)歷。充滿創(chuàng)造力的團(tuán)隊(duì)立足于大灣區(qū),服務(wù)全球,專(zhuān)注于降低蛋白質(zhì)組學(xué)分析技術(shù)難度,提升其在創(chuàng)新標(biāo)志物和創(chuàng)新藥物研發(fā)全鏈條中的應(yīng)用,以蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)為重大疾病提供精準(zhǔn)診療策略。