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蛋白質(zhì)組樣本前處理試劑盒

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SISPROT試劑盒空間可視化蛋白質(zhì)組學(xué)

Q:

如何在成像圖片上圈選ROI？

首先可以通過全景成像識別大范圍的ROI，即對全片進(jìn)行分區(qū)，選定某一塊大ROI作為收集樣本的顯微切割范圍；再通過智能分析算法，基于顯微切割目標(biāo)（如某種細(xì)胞類型、血管、間質(zhì)等）的形態(tài)、大小、熒光強(qiáng)度等多維度特征識別選定大ROI里的目標(biāo)小ROI。
Q:

如何保障顯微切割樣本的無污染收集？

進(jìn)行顯微切割時(shí)，從上至下是“膜-樣本-蓋玻片”的三明治結(jié)構(gòu)，樣本在膜片和蓋玻片中間可以確保樣本潔凈，整個(gè)過程無污染。
Q:

試劑盒如何保存運(yùn)輸？

試劑盒可常溫寄送。長期保存建議：試劑和酶可以都放在-20 ℃保存，耗材（獨(dú)立小包裝）單獨(dú)放常溫，避免耗材冷藏再取至室溫使用時(shí)吸潮會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
Q:

植物樣本中的某些物質(zhì)會影響 BCA 定量（例如還原劑），對此類樣品該如何處理？

植物樣本建議提取蛋白后使用丙酮進(jìn)行蛋白沉淀，清洗后再進(jìn)行蛋白定量測試。
Q:

酸化后樣本能否于-20℃過夜儲存或過周末？

溶液 pH 變化可引起某些蛋白質(zhì)沉淀，不建議將樣本酸化后長時(shí)間儲存。
Q:

步驟1.4加載樣本時(shí)一定需要上樣 30 μl 嗎？

不需要，總體積在 20-50 μl 之間即可。最多可以加載2次共60 μl左右：60 μl 可以加 6 μl Acidize，然后分兩次上樣，即加載樣本步驟上樣33 μl離心后，再重復(fù)上樣33 μl離心即可。
Q:

使用 Reduce 試劑進(jìn)行樣本還原超過 15 min，應(yīng)如何處理？

使用 Reduce 試劑時(shí)，推薦最佳還原時(shí)長為 15 min，還原時(shí)間最長不得超過 60 min。
Q:

酶解時(shí)，第二次需離心 5 sec，該如何控制？

設(shè)置離心機(jī)最短的時(shí)間，在離心啟動(dòng) 5 sec 后，手動(dòng)點(diǎn)擊停止即可。

如果有其他特殊情況的樣本類型或?qū)υ噭┖性聿僮鞯确矫嬗腥魏螁栴}，歡迎留言咨詢討論。

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